支气管哮喘有哪些特异性检查方法
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(1)皮肤试验
皮肤试验是最常用的特异性检查,包括斑贴、划痕、挑刺和皮内注射等。临床上以挑刺和皮内试验最为常用,如挑刺试验阴性,可作皮内试验复查。
①方法与原理:特异性患者接触过敏原后,可诱导产生特异性IgE,此种抗体粘附于皮肤或粘膜下层的肥大细胞表面的IgE受体上,当它与再次进入体内的过敏原相遇形成1个过敏原与2个IgE抗体的桥连,致使肥大细胞内发生一系列生化过程,释放过敏介质,在皮肤局部产生风团,红晕或瘙痒。在患者前臂内侧,常规消毒,然后用OT针筒,4号注射针头吸入不同种过敏原浸液分别注于前臂内侧皮内0.02ml,抗原点之间距为2.5cm。皮肤试验15~20分钟后,观察皮肤反应,局部风团及红晕大小,与对照点相比较。
②结果判断: a.阴性: 无丘疹及红晕,或非常轻微的红晕; b.可疑:红晕小于0.5cm。C.阳性:伴有红晕的风团0.5;伴有红晕的风团0.5~1.0cm;伴有红晕的风团大于1cm 但无伪足;伴有红晕的风团大于1.5cm,并有伪足。
③皮肤试验应注意的事项: a.嘱病人在皮肤试验前24~48小时,停用抗组织胺药物及皮质激素,但不必停用喘药。B.皮肤试验中,除观察局部即发反应外,还应注意观察病人有无胸闷、气急、面色苍白、出冷汗、皮肤瘙痒的皮疹等全身反应,一旦发现应及时处理,以免发生危险。C.嘱病人回家后,在72小时内继续观察有否迟缓反应。D.对可疑过敏原高度敏感者,尽量不作皮内试验,以免发生意外。
(2)放射过敏原吸附试验
放射过敏原吸附试验,它是特异性过敏原体外测定方法之一,是国外首选的体外诊断方法。它同其他体外测定方法一样,最大的优点是绝对安全,可完全避免体内方法可能发生的过敏反应 ,同时不会有使病人致敏或增加病人敏感性的危险,尤其对高度敏感的儿童特应性患者更为适宜。该试验与支气管激发试验的符合率为80%左右,与皮肤试验的符合率在70%~80%,与白细胞组织胺释放试验的相关系数为0.84。该试验使用离体血清,便于运输和保存,在方法上敏感性,特异性和重复性均很高,易于自动化,因此在国外是广泛应用而仅次于皮肤试验的测定方法。但该试验需要的放射性同位素,价格昂贵,半衰期短,操作和处理均需要专门的设备,使其广泛应用受到一定的限制。
①方法与原理:交联于固相载体的可溶性过敏原与含有对过敏特异性IgE的标本作用,加入同位素标记的抗人IgE,使它再与结合在过敏原上的IgE相作用,用γ计数器测定结合的同位素活性,待测标本中IgE抗体的浓度与测得的同位素活性成正比。
②结果判断:以核素脉冲数大于正常人平均值(需减去脐血放射性计数脉冲数值)3.5倍以上判定为阳性。
③激发试验
目前常用的激发试验有眼结膜、鼻内及支气管粘膜激发试验。该试验是唯一直接判断支气管哮喘较为敏感的试验,其结果与患者过敏史、临床症状和放射性过敏原吸附试验的结果之间有较好的相关性,在哮喘的病因诊断、临床疗效考核等方面有重要的作用,受到国内外重视。但需要一定的检测条件及技术,并易引起患者的严重发作,故临床应用上受到限制。
①支气管激发试验的方法与原理:用各种可疑致敏原浸液让患者雾化吸入后,观察有无哮喘的发作,并作肺功能测定,从而判断患者支气管对各种特异性致敏原的反应性。
②结果判断:凡试验中出现哮喘发作,或吸致敏原浸液后,FEV1下降大于15%~25%者为阳性。
③激发试验的注意事项: A.呼吸道感染或肺功能明显减退者不做该项检查。B.患者在做试验前,至少12小时停用β-受体激动剂和磷酸二脂酶抑制剂,24小时前停止用色甘酸钠,48时前停用抗组织胺药物,96小时前停用羟嗪类药物。C.吸入致敏原浸液后至少应观察30分钟,有条件者应观察24小时,便于发现迟缓反应和双相反应。D.病人感到反应较重时,应及时处理,或及时吸入气管解痉剂。
(4)酶联免疫吸附试验
酶联免疫吸附试验,简称ELISA,是特异性过敏原体外测定方法之一。ELISA的特异性和敏感性与放射过敏原吸附试验相似。它除了有放射过敏原吸附试验的优点外,而且还有相对廉价、无核素污染,安全和结合物相对稳定的特点。在诊断尘螨过敏中,ELISA和放射过敏原吸附试验的符合率达95%,ELISA与皮肤试验的符合率为89.5%。
①方法与原理:先将过敏原吸附在聚苯乙烯板或管壁上,当加入的待测血清含有特异性抗体时,抗体便能与相应的过敏原结合,再加入酶标记的抗IgE和相应的底物便可产生一定的颜色反应,用分光光度计测定其光密度,可推知特异性IgE的含量。
②结果判断:以高于正常人光密度平均值一倍定为阳性。
(5)白细胞组织胺释放试验
白细胞组织胺释放试验是变态反应主要测定方法之一,白细胞组织胺释放试验与皮试、临床症状和特异性IgE之间均有密切关系。一些报告指出,在变态反应性疾病诊断中,以临床病史为对照,白细胞组织胺释放试验为90%。
但此试验有操作复杂、费时、实验需血量较多、使用血储存不便的缺点。
①白细胞组织胺释放试验的方法与原理:由肝素抗凝白细胞分离,加抗原温育,然后用正丁醇苯和盐酸反苯提取组织胺,将组织胺与重结晶后的邻苯二醛缩合,可在荧光分光光度计下测定。
②结果测定:组胺释放率>50%为阳性。
(6)人嗜碱性粒细胞脱颗粒试验
该试验从细胞水平上反映了机体的过敏状态,为一敏感的体外测定方法。可做为Ⅰ型变态反应性疾病寻找特异性过敏原的有效手段。此试验虽实验条件要求简单,但操作上较为费时,重复性也较其他方法略差。
①原理:嗜碱粒细胞胞浆内的颗粒能被碱性染料染成蓝色,极易辨认和计数。当加入抗原后,即与结合在细胞上的IgE产生桥连,导致胞浆内的颗粒脱出,不再被染色,致使染色的细胞明显减少。
②结果判断:染色细胞减少率>30%定为阳性。
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